血清作为细胞实验中通用且关键的补充剂‌，其核心作用可从营养供给、细胞保护、代谢调节等维度展开。血清用对了可以使得后续的实验过程和结果事半功倍；但当血清使用不当,最后的结果会让我们苦不堪言!

那么，我们在日常的血清使用过程真的万无一失了么？快来参考一下我们总结汇总的一些血清试用的细节和技巧，别让细节问题影响到最后的实验的成败！

下面列举一些大家日常血清使用错误，并为大家梳理血清正确的使用步骤和过程。

最让大家烦恼的是血清的解冻,解冻时间久，过程复杂。但是最后的结果可能也会让人难以接受。

在日常实验室薪火相传，秘籍也会随着时间的流逝发生不可预期的偏离。走正常“修仙”大道，费时费力；但一次的简化会带来诸多的方便，相反的“创新”也可能会引起不可挽回的损失。

例如一些操作者会将-20℃冰箱冷冻的血清直接放入37℃水浴锅快速解冻，内心暗自窃喜（又好又快）。可最后最容易造成的结果就是有蛋白析出，血清出现沉淀。当然并不是这样做一定会出现这样的问题，但后续出一次问题造成的影响是不可逆的。那么血清融化的正确操作是:温度梯度融化，将血清从-20℃冰箱取出转入4℃冰箱保存过夜，次日部分融化，再转入室温条件下保存30min，再转入37℃水浴锅中水浴，每半小时轻微摇晃均匀避免局部受热不均导致蛋白物质析出。

另外一个也是常见且容易被各位“大能”所忽视的，就是血清的保存，包括冷冻和解冻两种状态。先明确正确的保存方式：长保存是需要放在-20℃冰箱或者冷库储存；另外融化的血清建议分装好少量临时用的短时间内4℃保存。

若-80℃长期保存在解冻过程会由于温差大,会导致血清沉淀大量析出。若血清解冻后长时间4℃保存会导致血清成分降解或沉淀形成 ，因子降解会导致后续使用效果严重偏离预期结果。若正常保存\融化的血清中出现部分沉淀，可以通过3500rpm/min离心10min除去。

第二个是关于血清灭活这个操作过程，很多操作者会习惯性地将血清直接放置于56℃水浴，直至完全灭活。这里要明确一下热灭活过程可能带来的影响，首先是长时间的高温加热会引起生长因子、维生素等的讲解，其次是56℃水浴加热也会破坏蛋白质结构引起蛋白质变性最终形成絮状沉淀等（该现象属于正常，合理操作下不影响血清使用）。那么，正确的血清灭活方式是依照上文中提到的血清融化方式融化后，再转入56℃水浴30分钟，过程中需要轻微混匀，避免受热不均影响产品效果。

第三点，就是常见的血清的替换过程。很多实验人员会直接进行血清的替换，但是后续的结果却与预期不一致。正确的血清替换过程需要进行梯度的替换，具体操作如下： A、原血清与新血清按照3:1的体积混合后，再配制细胞所需的完培，培养细胞； B、原血清与新血清按照1:1的体积混合后，再配制细胞所需的完培，培养细胞； C、原血清与新血清按照3:1的体积混合后，再配制细胞所需的完培，培养细胞； D、原血清与新血清按照0:1的体积混合后，再配制细胞所需的完培，培养细胞； 通过平缓的过度增加细胞对新血清的适应程度。正确的使用血清会让我们的实验事半功倍，同样也会减轻我们的很多的工作量。

如果您正在面临相关的问题，可以参照上述的几点进行调整,不要让不规范使用胎牛血清成为实验路上的绊脚石。