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「DIFF+」|针对国内临床株的hMPV中和抗体检测

作者:浙江迪福润丝生物科技有限公司 暂无发布时间 (访问量:15607)

hMPV疫苗开发之路

 

hMPV(人类偏肺病毒)于2001年被荷兰研究人员发现,属于肺病毒科偏肺病毒属,与RSV(呼吸道合胞病毒)非常相似。hMPV与 RSV 是引起儿童下呼吸道感染的两大主要病毒病原,且hMPV感染也是造成免疫功能缺陷病人和老年人发病及死亡的原因之一。hMPV疫苗开发旨在最终能够降低这一重要病原hMPV感染引起的经济负担。

 

福尔马林灭活疫苗因其稳定性良好、易于生产、病毒充分灭活无返祖危险存在等特点,被普遍应用于病毒疫苗研制。但福尔马林灭活的hMPV疫苗在接种后的自然感染中可能出现VED(疫苗增强性疾病,‌Vaccine-enhanced disease)效应而加重疾病,在随后的免疫攻毒实验中也观察到了疫苗加强的肺部疾病及T2反应,提示福尔马林灭活的hMPV疫苗可能不适用于hMPV疫苗研究1

 

随着技术的进步和新方法的开发,越来越多的新型hMPV疫苗进入后期临床实验。截至 2024 年 7 月,牛津大学(University of Oxford)的科学家们启动了一项第一阶段研究,对两种正在研究的 mRNA 疫苗进行测试:一种是同时针对呼吸道合胞病毒(RSV)和人类偏肺病毒(hMPV)的疫苗,另一种是只针对五到八个月大婴儿的 RSV 疫苗。这些疫苗由 Moderna 公司开发。

 

中和抗体检测——hMPV疫苗评价金标准

hMPV是一种单链RNA病毒,由8个基因组成,编码9种不同的蛋白质,其膜蛋白共有3种,包括粘附蛋白(G)、小疏水蛋白(SH)及融合蛋白F(图12),其中融合蛋白F是感染必需的,也是中和抗体的唯一靶蛋白。

图1:hMPV病毒结构示意图

目前还没有获得批准上市的hMPV疫苗和药物,但有几种有前途的减毒活疫苗,中和抗体检测是鉴定疫苗有效性的黄金标准,迪福润丝生物测定hMPV中和抗体的方法主要有荧光斑点计数法(Focus-Forming Assay, FFA)、细胞病变效应法(Cytopathic Effect, CPE)等。

 

hMPV临床株的重要性

 

hMPV有A、B两个基因型,每个基因型包括2个基因亚型,即A1、A2,B1、B2。目前有5个基因簇的HMPV在流行。hMPV临床株的重要性体现在以下几个方面:

1. 反应病毒自然存在的状态

临床株反映了病毒在自然界和人体内的实际变异和存在形式。它们与在实验室中经过多代培养或适应的病毒株可能有一定的差异。

2. 具有基因多样性

临床株可以展示病毒在不同患者间的基因变异,这有助于理解病毒的变异性和进化。

3. 病原性和毒力

通过研究临床株,可以更准确地了解病毒在自然感染中对人类健康的影响,包括其致病性和毒力。

4. 诊断和治疗

临床株对于开发和验证诊断工具(如PCR试剂盒)、治疗药物和疫苗至关重要。研究临床株有助于确保这些工具和产品能够有效地识别和对抗自然界中的病毒。

5. 抗原性和免疫逃逸

由于病毒会在自然宿主中产生突变,临床株的研究可以揭示病毒如何通过突变逃避宿主的免疫反应,这对疫苗的开发和更新至关重要。

6. 药物敏感性

通过对临床株的药物敏感性测试,可以了解病毒对抗病毒药物的敏感性或耐药性,指导临床治疗。

 

迪福润丝生物通过对hMPV临床株的培养(图2),完善了自有的生物资源库(Bio Database),可进行更加准确可靠的疫苗评价。检测用毒株包括hMPV A和hMPV B两种亚型共两种毒株A2、B2(图3)。

图2.迪福润丝生物hMPV临床样本分离培养

图3.迪福润丝生物hMPV毒株进化树

 

hMPV中和抗体检测服务流程

迪福润丝生物「DIFF+」CRO服务平台可针对hMPV疫苗及药物进行有效性评价,提供基于CPE法和荧光斑点计数法的hMPV中和抗体检测服务,该检测方法灵敏度高、检测迅速,并且该实验方法的特异性、重复性均能满足中和实验的要求,适用于高通量样本的检测。

hMPV中和抗体检测流程图

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 毒株资源及服务内容

基于上文所述的临床株资源,迪福润丝生物能提供的hMPV毒株资源库及中和抗体检测服务见下表:

 

 

毒株类型

毒株名称

hMPV毒株

hMPV-A

A2

hMPV-B

B2

 

 

hMPV血清中和抗体检测服务

样本类型

血清、血浆或抗体样本

检测方法

CPE法、荧光斑点计数法

质控标准

提供自研的阳性对照(单抗)

结果交付

检测报告

 

 

参考文献:

1. Ren J, Phan T, Bao X. Recent vaccine development for human metapneumovirus. J Gen Virol. 2015 Jul;96(Pt 7):1515-20. doi: 10.1099/vir.0.000083. Epub 2015 Feb 9. PMID: 25667325; PMCID: PMC4635448.

2. van den Hoogen BG, de Jong JC, Groen J, et al. A newly discovered human pneumovirus isolated from young children with respiratory tract disease. Nat Med. 2001;7(6):719-724.

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