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在研磨幼猪内脏组织实验中 你有遇到过这些问题吗?

作者:北京昊诺斯科技有限公司 2016-10-21T16:33 (访问量:3036)

在研磨幼猪内脏组织实验中 你有遇到过这些问题吗?

 

 

 

 

本期昊诺斯第14期组织研磨和样品处理分享、讨论,我们给大家分享的内容是——研磨幼猪内脏组织测药物代谢,邀请到了昊诺斯销售经理给大家做分享。
 
 
那接下来,就让我们先睹为快,看看这个案例的情况。
 

 

 
实验前样品准备
 
 
实验:研磨幼猪内脏组织测药物代谢
试验样品:幼猪心、肝、脾、肺、肾、脑6个部位的组织
实验目的:药物代谢测定分析
实验步骤:
1、取出置于冰箱内的幼猪心、肝、脾、肺、肾、脑组织样品略解冻,每个部位的样品各取2份为一组对照,切成小块后分别置于离心管内,编号并放进冰盒中;
2、每次研磨将以对照组为单位进行。以脾脏研磨为例:将2份脾脏组织样品分别转移至2个鼎昊源TL1000小型组织研磨仪配套的硬质塑料研磨管中,每管各加入不锈钢珠1颗,其中一管加入磷酸盐组织液,另一管加入醋酸铵组织液,盖好管盖,安装上机;
3、采用自动间歇研磨方法,组织研磨仪转速适当,设置循环,组织研磨仪研磨完成后用吸管转移回之前对应编号的离心管中;
4、由于各内脏组织样品的韧性不同,针对肝和脑组织的研磨,采用仅一次研磨的方法,使研磨时间被缩短,但组织研磨仪研磨效果仍然很好;针对心脏组织的研磨,采用了鼎昊源TL1000小型组织研磨仪配套的不锈钢研磨罐,使研磨更加匀细。
 
 
实验结果:
 
 
A.磷酸盐组织液
 
 
B.醋酸铵组织液
 
 
C.最终结果图

此外,我们的分享嘉宾还跟群内用户进行了激烈的分享、讨论,让我们一同来看看擦出了怎样的火花吧!
 
 
昊诺斯嘉宾大家好,今天本次讨论的主讲在上海展会,所以由我来代述一下这次的实验样品还是内脏组织,但实验目的是成分的测定。
 
 
昊诺斯嘉宾我记得以前曾经在讨论会中有相似的案例,说明目前做这类研究的实验室还是挺多的。做这类实验的一个共同的特点就是样品都比较新鲜,这和做生物大分子的实验有所不同,样品基本保持了原有的性状,这样有利于代谢产物的收集和测定的准确。
 
昊诺斯嘉宾如果看过实验报告的老师会发现,在这6种组织中心肺的研磨是稍微费力一些的,其他组织都是容易处理的,但是这类实验虽然破碎样品难度不大,但要求的单个样本量却比较大,这是为了提取到足够的产物,所以我们在这个实验中,用的都是5ml的研磨管,在处理量上完全满足实验要求。
 
昊诺斯嘉宾正如报告中所述,这次实验用了2种缓冲液,磷酸盐的效果好于醋酸盐的,这可能是跟酸性强弱有关,但两种溶液测定成分都是没有问题的。
 
用户只是负20℃够吗?发现肌肉类很少用液氮的
 
昊诺斯嘉宾刚才提到了,这次实验的样本基本是新鲜的,-20℃只是暂时保存,就和超市里生鲜区的肉差不多。
 
用户也就是说不用冻硬?这倒是我第一次见
 
昊诺斯嘉宾我们和很多老师讨论过,动物类的样本,特别是新鲜的,冻液氮会适得其反
 
用户哦,我只做过植物的。
 
昊诺斯嘉宾因为里面的水分太多了,液氮无法使其彻底脱水,反而会结很硬的冰。
 
用户嗯,植物会薄很多,表面积比体积比大,去水快。
 
昊诺斯嘉宾是,也分情况。前两天碰到一个做苹果的老师,他也是冻液氮,结果一小块苹果冻得跟钢珠似得,反而也不好研磨了,后来干脆直接磨,磨好了。
 
用户应该切片,而不是块,或许好些。
 
昊诺斯嘉宾对,但这个老师的样品是从-80℃冰箱里直接拿出来的,采集时切的小块,他也是怕温度变化影响结果,所以才又没切又加液氮。
 
用户可能是怕氧化。
 
昊诺斯嘉宾他做的是DNA,只要不太高的温度都没问题,而且这种从-80℃冰箱里拿出来的样本,目前最多采用的是加缓冲液研磨,特别是动物样品。
 
用户加缓冲液是为了保护?
 
昊诺斯嘉宾一来有助于保护样本,二来是帮助化冻,还有的好处就是有利于均匀。
 
用户嗯,液体容易混合均匀
 
用户这两种缓冲液有何区别?
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