促红细胞生成素（Erythropoietin，EPO）是一种在肾脏中主要产生的具有进化保守性的激素，EPO属于第一类细胞因子超家族，由165个氨基酸形成四个α螺旋结构（图1）。

图1 人EPO的一级结构及其氨基酸序列

mRNA药物作为一种新型的治疗手段，在疫苗、蛋白替代治疗，癌症免疫治疗，免疫细胞工程等方面具有广阔的应用前景，脂质体纳米粒（LNPs）作为修饰mRNA的主要递送工具，其递送效率直接影响mRNA药物的药效。

为评估LNPs的体外递送效率和mRNA药效，研究人员使用装载不同含量的修饰hEPO-mRNA的LNPs转染Huh7细胞，基于EPO是分泌蛋白，可以从细胞中分泌出来，因此，可在指定的时间点收集细胞上清，并使用ELISA来测定hEPO的表达，研究结果显示，在体外研究中，Huh7细胞以剂量依赖和时间依赖的方式能有效表达hEPO（图2）。

图2 iLP171/mRNA介导的体外蛋白质表达

同时，为评估LNPs的体内递送效率和mRNA药效，将装载修饰hEPO-mRNA的不同类型LNPs注射到小鼠体内，经过一段时间后，研究人员用ELISA方法检测小鼠血清中hEPO含量，来评估LNPs的体内递送效率和mRNA的药效（图3）。

图3 分泌蛋白的mRNA递送方案

综上，通过ELISA技术检测细胞上清、血清中hEPO的含量，可有效地评估以脂质纳米粒子（LNPs）为基础的修饰mRNA的药理和药效相关研究。

ClinMax™ Human Erythropoietin (EPO) ELISA Kit, PRO

（Cat. No. CEA-C027）

For each experiment, each ELISA plate needs to set the standard curve. The minimum detectable concentration of EPO is less than 0.67 mIU/mL.

为评估CEA-C027和竞品R两个产品的精密度，测试了不同浓度的加标样本，每个浓度重复测试10次，可接受范围：CV< 10%。结果显示，所有样本的CV值都低于6%，优于接受范围。

为评估CEA-C027和竞品R的稀释线性，对高值的加标样本（血清和EDTA血浆）梯度稀释后进行分析。结果显示，所有分析样本的平均回收率在90%-120%之间，在接受范围之内。

为评估CEA-C027和竞品R的回收率，对低值（加标量接近LLOQ）的加标样本（血清和EDTA血浆）进行分析。结果显示，血清和EDTA血浆样本的平均回收率在80%和110%之间。

为了评估溶血对血清样本分析的影响，测试了2%血红蛋白的溶血模拟血清样本。结果显示，使用CEA-C027检测的分析物回收率在90%-110%之间，并没有受到溶血基质的影响，而溶血基质可能会影响竞品R的EPO检测。

为了评估高脂对血清样本分析的影响，测试了3%甘油三酯的高脂模拟血清样本。结果显示，所有分析物回收率都在80%-120%之间，两个试剂盒都没有受到高脂基质的影响。

为了评估CEA-C027和竞品R的分析一致性，两个产品同时测试了40个健康人样本和14个病人样本。结果显示，两个产品检测结果的一致性高，R²>0.95。