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QIAGEN-囊泡exosome RNA的完美解决方案

作者：杭州联科生物技术股份有限公司 2015-05-03T06:12 (访问量:8692)

exosome是直径约为30-150nm的小囊泡，在30年前被人们所发现。exosome天然存在于所有体液中，包括血液、唾液、尿液和母乳，且其蛋白、RNA和脂肪成分特异，早期的研究认为，exosome执行蛋白运输功能，特异靶定受体细胞，交换蛋白和脂类或引发下游信号事件。直到2007年，研究人员发现exosome也运输核酸，参与细胞间通讯。至此，这种小囊泡才被人重视，并成为热门的研究对象。细胞外微泡，运载RNA（包括mRNA、miRNA、lncRNA）、DNA及蛋白质，为细胞间信号交流起着重要作用。

QIAGEN exoRNeasy Serum/Plasma Kit改进了传统的超速离心微泡分离方法，能够在20分钟内快速纯化得到细胞外囊泡。该试剂盒采用Exosome Diagnostics, Inc.公司的技术，通过离心柱和特制缓冲液，从多达4 ml的预过滤血浆中分离exosomes。之后使用QIAGEN miRNeasy技术分离总RNA。整个实验流程，从血清/血浆样本到RNA产物，只需1小时。

性能优势：


exoRNeasy纯化exosomes和其他细胞外微泡与超速离心法相比，不仅速度更快，并且产物纯度更高。扫描电镜显示，虽然这两种纯化技术都能够纯化预期大小的完整的囊泡，但超速离心法的产物还含有很多不符合预期的更小、或其他形状的细胞结构。


通过RT-qPCR实验对exoRNeasy纯化的RNA产物和exoEasy分离柱流出液进行分析，结果显示，exoRNeasy的产物包括血浆中所有mRNA，包括细胞外囊泡的miRNA，且不含细胞。

操作流程 ：

在exosomes纯化步骤，预过滤的血浆（不包含大于0.8 μM的微粒）与Buffer XBP混合，加至exoEasay亲和性膜离心柱上，结合到柱上。使用Buffer XWP洗涤结合在膜上的囊泡，之后使用QIAzol裂解。
在RNA分离步骤，在QIAzol洗脱液中加入氯仿，回收水相，将其与乙醇混合。包括miRNA在内的总RNA结合到离心柱上，洗涤三次后洗脱。

产品信息 ：

——囊泡RNA研究完整解决方案：

研究方案	产品	货号	目录价
纯化来自血清/血浆样本中exosome中的RNA(含miRNA)	exoRNeasy Serum/Plasma Maxi Kit (50)	77064	26420
	exoRNeasy Serum/Plasma Midi Kit (50)	77044	10560
	exoRNeasy Serum/Plasma Starter Kit (20)	77023	5790
检测exosome中miRNA产品套装	miScript II RT Kit (12)	218160	1450
	miScript Primer Assay (100)	218300	1060
	miScript SYBR Green PCR Kit (200)	218073	5380
	miRNeasy Serum/Plasma Spike-In Control	219610	560
检测exosome中lncRNA产品套装	RT² First Strand Kit (12)	330401	2640
	RT² lncRNA qPCR Assay (200)	330701	1590
	QuantiNova SYBR Green PCR Kit (500)	208054	2880
检测exosome中mRNA产品套装	RT² First Strand Kit (12)	330401	2640
	QuantiTect® Primer Assay (200)	249900	900
	QuantiNova SYBR Green PCR Kit (500)	208054	2880

规格解释：

产品货号	产品名称	规格
77023	exoRNeasy Serum/Plasma Starter Kit (20)	10 次Maxi大抽+ 10 次Midi中抽（样本囊泡RNA量不确定时，建议选择尝试确定初始样本）
77044	exoRNeasy Serum/Plasma Midi Kit(50)	50次；一次最大抽提1ml血浆/血清
77064	exoRNeasy Serum/Plasma Maxi Kit (50)	50次；一次最大抽提4ml血浆/血清

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https://www.qiagen.com/cn/products/catalog/sample-technologies/rna-sample-technologies/exorneasy-serum-plasma-kits/#orderinginformation
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