我们实验中,标本中大多数神经激素、肽类物质,以及蛋白质为水溶性,在用于研究之前,常需固定,即使其凝固以降低其水溶性。甲醛能与蛋白质的氨基反应,使蛋白质凝固,因此在医药上可做检验时的组织固定剂、以及防腐剂等。而在固定剂中,最常用的是多聚甲醛。
多聚甲醛染色前固定
做实验的过程中,因为排不上实验仪器、希望标本能够较长时间存放等等原因,很多实验人员习惯性都会用4%多聚甲醛预先固定标本。也有为了灭活标本里面可能存在的微生物(细菌、病毒等),起到安全保障作用;或者是做胞内染色前的准备,进行固定细胞 。
然而,可能很多人忽视了一点,就是如果在染色之前用多聚甲醛固定标本,细胞表面有些位点在固定后构象发生改变,使得抗体无法结合产生假阴性,也可能由于固定作用,导致其它位点产生非特异性结合(假阳性)。
因此,知道哪些抗体染色前不能预固定,十分重要。贴心的技术人员帮我们做了一系列测试,下面两张表,可以看的出来,大多数不能固定的抗体都是趋化因子受体类目的,这类抗体,大家在实验中要注意不能先固定后染色。
—— 人源样本——
实验样本
|
克隆号
|
标记物
|
是否适合固定
|
裂解全血, 淋巴细胞
|
L263G8
|
CCR8
|
No
|
裂解全血, 淋巴细胞
|
1712380
|
CCR10
|
No
|
裂解全血, 淋巴细胞
|
UCHT1
|
CD3
|
Yes
|
裂解全血
|
OKT3
|
CD3
|
Yes
|
裂解全血
|
HIT3a
|
CD3
|
Yes
|
裂解全血
|
SK7
|
CD3
|
Yes
|
裂解全血
|
OKT4
|
CD4
|
Yes
|
裂解全血
|
RPA-T4
|
CD4
|
Yes
|
裂解全血
|
UCHT2
|
CD5
|
Yes
|
裂解全血, 淋巴细胞
|
BL-CD6
|
CD6
|
Yes
|
裂解全血, 淋巴细胞
|
CD7-6B7
|
CD7
|
Yes
|
裂解全血
|
RPA-T8
|
CD8
|
Yes
|
裂解全血
|
HIT8a
|
CD8
|
Yes
|
裂解全血, 淋巴细胞
|
HI111
|
CD11a
|
Yes
|
裂解全血
|
ICRF44
|
CD11b
|
Yes
|
裂解全血, 单核细胞
|
3.9
|
CD11c
|
No
|
裂解全血
|
WM15
|
CD13
|
Yes
|
裂解全血, 单核细胞
|
M5E2
|
CD14
|
Yes
|
裂解全血
|
HCD14
|
CD14
|
Yes
|
裂解全血
|
W6D3
|
CD15
|
Yes
|
裂解全血, 粒细胞
|
HI98
|
CD15
|
Yes
|
裂解全血
|
3G8
|
CD16
|
Yes
|
裂解全血
|
TS1/18
|
CD18
|
Yes
|
裂解全血, 淋巴细胞
|
HIB19
|
CD19
|
Yes
|
裂解全血
|
EBVCS-5
|
CD23
|
Yes
|
裂解全血, 淋巴细胞
|
ML5
|
CD24
|
No
|
裂解全血
|
BC96
|
CD25
|
No
|
裂解全血
|
O323
|
CD27
|
Yes
|
裂解全血, 淋巴细胞
|
M-T271
|
CD27
|
Yes
|
裂解全血
|
CD28.2
|
CD28
|
Yes
|
裂解全血
|
WM59
|
CD31
|
Yes
|
裂解全血
|
581
|
CD34
|
No
|
裂解全血
|
HIT2
|
CD38
|
Yes
|
裂解全血
|
5C3
|
CD40
|
Yes
|
裂解全血
|
HI30
|
CD45
|
Yes
|
裂解全血, 淋巴细胞
|
CC2C6
|
CD47
|
Yes
|
裂解全血
|
CBR-IC3/1
|
CD50
|
Yes
|
裂解全血, 淋巴细胞
|
MEM-188
|
CD56
|
Yes
|
裂解全血, 淋巴细胞
|
HCD56
|
CD56
|
Yes
|
裂解全血, 淋巴细胞
|
DREG-56
|
CD62L
|
Yes
|
裂解全血, 单核细胞
|
IT2.2
|
CD86
|
Yes
|
裂解全血, 粒细胞
|
S5/1
|
CD88
|
Yes
|
裂解全血, 淋巴细胞
|
DX2
|
CD95
|
Yes
|
裂解全血, 淋巴细胞
|
HCD99
|
CD99
|
Yes
|
裂解全血, 淋巴细胞
|
A019D5
|
CD127 (IL-7Rα)
|
No
|
裂解全血
|
Ber-ACT35
|
CD134
|
No
|
裂解全血
|
SE5A5
|
CD172a/b
|
Yes
|
裂解全血
|
LSB2.20
|
CD172g
|
Yes
|
裂解全血, 粒细胞. 淋巴细胞
|
8F1/CXCR1
|
CD181 (CXCR1)
|
No
|
裂解全血, 粒细胞
|
5E8/CXCR2
|
CD182 (CXCR2)
|
No
|
裂解全血, 淋巴细胞
|
G025H7
|
CD183 (CXCR3)
|
No
|
裂解全血, 淋巴细胞
|
12G5
|
CD184 (CXCR4)
|
Yes
|
裂解全血, 粒细胞
|
500000000
|
CD193 (CCR3)
|
No
|
裂解全血, 淋巴细胞
|
L291H4
|
CD194 (CCR4)
|
No
|
裂解全血, 淋巴细胞
|
T21/8
|
CD195 (CCR5)
|
No
|
裂解全血, 淋巴细胞
|
HEK/1/85a
|
CD195 (CCR5)
|
No
|
裂解全血, 淋巴细胞
|
J418F1
|
CD195 (CCR5)
|
No
|
裂解全血, 淋巴细胞
|
G034E3
|
CD196 (CCR6)
|
No
|
裂解全血, 淋巴细胞
|
G043H7
|
CD197 (CCR7)
|
No
|
裂解全血, 淋巴细胞
|
L053E8
|
CD199 (CCR9)
|
No
|
裂解全血
|
C1.7
|
CD244 (2B4)
|
Yes
|
裂解全血
|
11C1
|
CD268 (BAFF-R)
|
Yes
|
裂解全血, 淋巴细胞
|
EH12.2H7
|
CD279
|
No
|
裂解全血
|
TL2.1
|
CD282 (TLR2)
|
Yes
|
裂解全血, 淋巴细胞
|
2A9-1
|
CX3CR1
|
No
|
裂解全血, 淋巴细胞
|
K0124E1
|
CX3CR1
|
No
|
裂解全血
|
L243
|
HLA-DR
|
Yes
|
裂解全血
|
MHM-88
|
IgM
|
No
|
—— 小鼠样本 ——
实验样本
|
克隆号
|
标记物
|
是否适合固定
|
C57BL/6 小鼠脾脏
|
1B1
|
CD1d
|
No
|
C57BL/6 小鼠脾脏
|
17A2
|
CD3
|
Yes
|
C57BL/6 小鼠脾脏
|
145-2C11
|
CD3
|
Yes
|
C57BL/6 小鼠脾脏
|
RM4-5
|
CD4
|
Yes
|
C57BL/6 小鼠脾脏
|
GK1.5
|
CD4
|
Yes
|
C57BL/6 小鼠脾脏
|
RM4-4
|
CD4
|
No
|
C57BL/6 小鼠脾脏
|
53-7.3
|
CD5
|
Yes
|
C57BL/6 小鼠脾脏
|
53-6.7
|
CD8a
|
Yes
|
C57BL/6 小鼠脾脏
|
YTS156.7.7
|
CD8b
|
Yes
|
C57BL/6 小鼠脾脏
|
53-5.8
|
CD8b.2
|
No
|
C57BL/6 小鼠骨髓
|
M1/70
|
CD11b
|
Yes
|
C57BL/6 小鼠脾脏
|
N418
|
CD11c
|
No
|
C57BL/6 小鼠脾脏
|
93
|
CD16/32
|
No
|
C57BL/6 小鼠脾脏
|
6D5
|
CD19
|
Yes
|
C57BL/6 小鼠脾脏
|
7000000000
|
CD21/35
|
Yes
|
C57BL/6 小鼠脾脏
|
B3B4
|
CD23
|
No
|
C57BL/6 小鼠脾脏
|
M1/69
|
CD24
|
No
|
C57BL/6 小鼠脾脏
|
LG.3A10
|
CD27
|
Yes
|
C57BL/6 小鼠脾脏
|
37.51
|
CD28
|
No
|
C57BL/6 小鼠脾脏
|
HMβ1-1
|
CD29
|
Yes
|
C57BL/6 小鼠脾脏
|
MEC13.3
|
CD31
|
杭州联科生物技术股份有限公司 商家主页地 址: 浙江省杭州市拱墅区祥园路108号智慧信息产业园三期三号楼13层 联系人: 电 话: 4006721600 传 真: 4006721600 Email:network@liankebio.com 相关咨询新品速递 | 前列腺素E2(PGE2)ELISA Kit (2019-07-15T09:52 浏览数:3507) 做流式有一套|你知道的Treg,答题抽奖好礼不停 (2019-03-11T09:42 浏览数:5321) 联科生物喊你吃年夜饭啦! (2019-01-25T13:37 浏览数:6871) 在皮氏培养皿中生长的血管与人类血管非常相似 (2019-01-23T15:04 浏览数:5572) Human ELISA Kit 推荐:人降钙素ELISA试剂盒 (2019-01-10T14:35 浏览数:5442) 联科生物新品:妊娠研究相关试剂盒 (2019-01-09T17:05 浏览数:6134) 联科生物第四季ELISA大赛——杭州站 (2019-01-04T15:33 浏览数:6265) 全血 Foxp3 实验操作步骤 (2018-12-10T09:52 浏览数:6906) 人 Treg 试剂盒操作步骤 (2018-12-06T10:03 浏览数:6368) 流式胞内染色步骤 (2018-11-12T11:34 浏览数:8084) ADVERTISEMENT
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